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  • 2021

    1-19

    轉基因植物EPSPS基因核酸檢測試劑盒反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿...

  • 2021

    1-14

    麻風桿菌(ML)核酸檢測試劑盒實驗要點:1.在適條件下,DNA—CTAB沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的DNA沉淀中可能含有雜質,特別是多糖,使DNA沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA.—CTAB沉淀。2.CTAB溶液在低于15℃時會析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預熱。3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質變性,但酚不能*抑制RNA酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚的混合液,可減輕這...

  • 2021

    1-13

    TGF-β1elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:1.取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。2.分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。3.加樣:依照標準品的順序分別加入100ul的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入100ul的蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測樣本。4.加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50...

  • 2021

    1-7

    馬動脈炎病毒(EAV)核酸檢測試劑盒反應的特異性決定因素:①引物與模板DNA特異正確的結合;②堿基配對原則;③TaqDNA聚合酶合成反應的忠實性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及TaqDNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就...

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